溶酶體染色試劑盒實(shí)驗前的準備工作

 

  溶酶體染色試劑盒是細胞控制其生長(cháng)潛能的保障機制一般含義是復制衰老（Replicative senescence，RS），指正常細胞經(jīng)過(guò)有限次數的分裂后，停止分裂，此時(shí)細胞雖然是存活的，但是細胞形態(tài)和生理代謝活性發(fā)生明顯變化的現象。體外衰老細胞研究常用的生物學(xué)特征包括不可逆的生長(cháng)停滯；）與衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶senescence associated β-galactosidase, SA β-gal）的活化。作為溶酶體內的水解酶，通常在pH 4.0的條件下表現活性。但是衰老細胞內其在pH 6.0的條件下表現活性，且隨著(zhù)傳代次數的增加，細胞群體中表現衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶的細胞數目逐漸增加。

 

  溶酶體染色試劑盒注意事項，為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗服并戴一次性手套操作，本試劑盒固定液B存在一定的腐蝕性和毒性，操作時(shí)請注意小心防護。染色液E剛剛溶解后會(huì )觀(guān)察到有沉淀，屬正?，F象，充分混勻或者漩渦震蕩可促使沉淀全部溶解，之后用于染色實(shí)驗。X-Gal溶液需要避光保存。染色工作液也需要避免光照。染色后的細胞樣品可以在 4ºC冰箱保存，但也需避免光照。細胞β-半乳糖苷酶活性強，孵育3 h即顯示陽(yáng)性；細胞β-半乳糖苷酶活性弱，則需要孵育24 h。細胞染色zui長(cháng)孵育時(shí)間為 24 h。細胞呈現藍色的部位即為衰老細胞特異性β-半乳糖苷酶活性部位。細胞衰老β-半乳糖苷酶染色反應依賴(lài)于特定的pH值，不能用于細胞培養的CO2培養箱中進(jìn)行染色反應。因為CO2培養箱中較高濃度的CO2會(huì )影響染色工作液的pH值，導致染色失敗。本試劑盒適合各種類(lèi)型和規格的培養細胞：載玻片，載玻片培養皿，35 mm 培養皿和各種孔數的細胞培養板，只需按照一定的比例調整工作液用量即可。