溶酶體染色試劑盒的重要理論
更新時(shí)間：2018-08-09 點(diǎn)擊次數：1228
溶酶體染色試劑盒通常勻化次數為20至40下（或細胞顆粒群/組織塊狀消失為止）達到80％的細胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細胞類(lèi)型會(huì )存在差異。用戶(hù)可以通過(guò)顯微鏡觀(guān)察3微升勻漿物的細胞裂解程度，完整細胞呈現發(fā)亮的圓環(huán)，低于50％可以增加勻化次數。通常孵育5分鐘（不宜超過(guò)5分鐘）達到80％的細胞裂解為理想狀態(tài)，但不同的組織或細胞類(lèi)型會(huì )存在差異。用戶(hù)可以通過(guò)顯微鏡觀(guān)察3微升裂解物的細胞裂解程度，完整細胞呈現發(fā)亮的圓環(huán)。低于50％可以增加孵育時(shí)間和渦旋震蕩次數。
溶酶體染色試劑盒可將胞內廢物、脂質(zhì)、碳水化合物、蛋白質(zhì)及其他大分子等物質(zhì)分解為小分子化合物。正常的溶酶體功能使細胞能有效的動(dòng)員和循環(huán)利用細胞組分，但也能阻止受損細胞器、錯誤折疊蛋白質(zhì)及入侵病原物的積累。雖然溶酶體存在于所有動(dòng)物細胞中，但在抗病細胞如淋巴細胞中豐度高。溶酶體含有約50種不同的降解酶，所有水解酶在pH5左右活性，但其周?chē)|(zhì)中pH為7.2。溶酶體膜內含有一種特殊的轉運蛋白，可以利用ATP水解的能量將胞質(zhì)中的H+泵入溶酶體，以維持其pH5。這些酶協(xié)同作用，以維持蛋白和細胞器的穩態(tài)。若溶酶體內的這些酶發(fā)生異常則會(huì )導致多種疾病的產(chǎn)生，這些酶如組織蛋白酶D的表達水平顯著(zhù)降低。上調表達溶酶體基因的水平，正探索作為治療神經(jīng)退行性疾病如帕金森癥的一種潛在的治療途徑。
統計學(xué)分析所得計量數據采用均數±標準差(X±S)表示采用SPSS17.0進(jìn)行統計分析，兩樣本均數的比較采用獨立樣本t檢驗,p<0.05為具有統計學(xué)差異。每組實(shí)驗結果重復3次。結果2.1 Lysotracker Red染色觀(guān)察CREG對小鼠腹腔巨噬細胞溶酶體發(fā)生數量的影響不同實(shí)驗組小鼠腹腔巨噬細胞Lysotracker Red染色結果顯示，與C57小鼠相比，CREG+/-雜合子小鼠腹腔巨噬細胞中lysotracker紅色熒光強度明顯減少。而與CREG+/-雜合子小鼠相比，微量滲透泵以30μg/kg/d皮下給予重組CREG蛋白的CREG+/-雜合子小鼠腹腔巨噬細胞lysotracker紅色熒光強度明顯增加。
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